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Cytométrie en flux

Ressource de cytométrie en flux analytique de pointe pour répondre à tous les aspects de vos besoins en matière de développement de médicaments
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Les percées les plus récentes dans la recherche et le traitement du cancer ont eu lieu dans le domaine de l’immuno-oncologie, en utilisant de nouvelles immunothérapies pour renforcer le système immunitaire de l’hôte afin de cibler et de détruire plus efficacement les cellules tumorales. Parmi la liste des traitements approuvés par la FDA ayant une activité immunorégulatrice figurent les immunothérapies à base d’anticorps et de cytokines, les médicaments à petites molécules et la thérapie cellulaire. Le succès de ces thérapies et d’autres pour prolonger la survie a mis l’accent sur la mise au point de nouvelles thérapies à agent unique et combinées plus efficaces dans le traitement du cancer.

Le développement productif d’immunothérapies nécessite une analyse quantitative robuste et à haut débit du système immunitaire dans le microenvironnement tumoral, le sang périphérique et d’autres tissus de l’hôte.

Pour répondre à ce besoin, notre service de cytométrie en flux contractuel vous fournit une ressource de cytométrie en flux analytique avancée et à la pointe de la technologie pour répondre à tous les aspects de vos besoins en matière de développement de médicaments. Exécutez vos études de génération d’échantillons avec nous ou envoyez-nous par envoi express vos échantillons précliniques ou cliniques non régis par la CLIA et nous nous occuperons de la cytométrie en flux pour vous.

Profilage immunitaire de base à complet

Avec plus de 50 ans d’expertise combinée, notre équipe d’analyse à service complet peut ajouter un bras de cytométrie en flux ex vivo à toute étude in vivo . Notre liste de panels d’anticorps standardisés (voir ci-dessous) a été validée dans plusieurs modèles de cancer in vivo et fournit une analyse de base à complète d’un large éventail de sous-ensembles immunitaires des lignées lymphoïdes et myéloïdes pour capturer les changements qui se produisent dans la réponse immunitaire déclenchée par le traitement par agent de test in vivo . Voir une liste de nos panneaux ci-dessous.

Analyse des cellules T CD4+, CD8+ et régulateurs combinée à l’interrogation des points de contrôle/marqueurs d’activation immunitaires à l’aide du Panel de cellules T

Le Panel complet de cellules T combine l’utilité des panels de base, régulateurs et d’activation/épuisement des lymphocytes T en une seule analyse complète du profil des lymphocytes T dans les tissus. Les données ci-dessus montrent (A) l’analyse des sous-ensembles de lymphocytes T CD4+/CD8+ dans les tumeurs murines à l’aide d’un modèle de carcinome du sein 4T1, (B) l’analyse des lymphocytes T régulateurs dans la rate de souris porteuses d’adénocarcinome colorectal CT.26, et (C) les niveaux d’expression de CTLA-4, PD-1 et Ki-67 dans les sous-ensembles de lymphocytes T de tumeurs dérivées de la lignée cellulaire A20 (lymphome à cellules B).

Analyse des sous-ensembles de lymphocytes T et B dans la rate murine.

Le panel de cellules T et B de base peut être utilisé pour quantifier les cellules T CD4+ et CD8+ ainsi que les fractions de cellules B dans des échantillons hétérogènes. Seuls 6 canaux de fluorescence sont occupés par ce panneau, ce qui laisse plusieurs canaux disponibles pour une caractérisation cellulaire plus poussée en ajoutant des anticorps supplémentaires. Dans l’étude ci-dessus, les lymphocytes T CD3+ et les lymphocytes B CD19+ ont été analysés dans la fenêtre des cellules vivantes. Les lymphocytes T ont ensuite été subdivisés en populations CD4+ et CD8+.

Analyse de l’activation des lymphocytes T dans le modèle murin de lymphome B A20

L’un des défis rencontrés lors du développement de nouvelles immunothérapies est de surmonter la perte d’activité antitumorale qui se produit dans les cellules T au sein du microenvironnement tumoral. Un état appelé épuisement des lymphocytes T, qui peut être identifié sur la base de l’expression relative de différents points de contrôle immunitaires et marqueurs d’activation. Le panel d’activation/épuisement des lymphocytes T est une extension du panel de base des lymphocytes T et peut être utilisé pour mesurer l’expression de certains biomarqueurs clés dans différents tissus. Dans l’étude ci-dessus, l’expression des protéines de point de contrôle immunitaire CTLA-4 et PD-1 ainsi que du marqueur de prolifération de substitution Ki-67 a été mesurée dans des sous-ensembles de lymphocytes T au sein de tumeurs dérivées de lignées cellulaires A20.

Analyse de l’activation des lymphocytes T dans le modèle murin de lymphome B A20

L’un des défis rencontrés lors du développement de nouvelles immunothérapies est de surmonter la perte d’activité antitumorale qui se produit dans les cellules T au sein du microenvironnement tumoral. Un état appelé épuisement des lymphocytes T, qui peut être identifié sur la base de l’expression relative de différents points de contrôle immunitaires et marqueurs d’activation. Le panel d’activation/épuisement des lymphocytes T est une extension du panel de base des lymphocytes T et peut être utilisé pour mesurer l’expression de certains biomarqueurs clés dans différents tissus. Dans l’étude ci-dessus, l’expression des protéines de point de contrôle immunitaire CTLA-4 et PD-1 ainsi que du marqueur de prolifération de substitution Ki-67 a été mesurée dans des sous-ensembles de lymphocytes T au sein de tumeurs dérivées de lignées cellulaires A20.

Analyse des cellules T CD4+, CD8+ et régulateurs combinée à l’interrogation des points de contrôle/marqueurs d’activation immunitaires à l’aide du Panel de cellules T

Le Panel complet de cellules T combine l’utilité des panels de base, régulateurs et d’activation/épuisement des lymphocytes T en une seule analyse complète du profil des lymphocytes T dans les tissus. Les données ci-dessus montrent (A) l’analyse des sous-ensembles de lymphocytes T CD4+/CD8+ dans les tumeurs murines à l’aide d’un modèle de carcinome du sein 4T1, (B) l’analyse des lymphocytes T régulateurs dans la rate de souris porteuses d’adénocarcinome colorectal CT.26, et (C) les niveaux d’expression de CTLA-4, PD-1 et Ki-67 dans les sous-ensembles de lymphocytes T de tumeurs dérivées de la lignée cellulaire A20 (lymphome à cellules B).

Analyse des cellules tueuses naturelles (NK) et des sous-ensembles de cellules dendritiques (DC) dans un modèle d’adénocarcinome colorectal CT.26

Les sous-ensembles de cellules NK sont bien connus pour leur activité antitumorale et leur capacité à contrôler la croissance de nombreuses tumeurs. Les DC ont une fonction à la fois pro et anti-tumorale et sont une cible pour les immunothérapies basées sur les vaccins. Il a été démontré que les cellules NKDC (alias IKDC) possèdent des caractéristiques fonctionnelles des cellules NK et des DC. Le panel Natural Killer Cell peut être utilisé pour identifier ces sous-ensembles. L’étude ci-dessus a été réalisée pour quantifier les pourcentages de cellules NK, de DC et de sous-ensembles NKDC dans les cellules immunitaires Ly6G-Ly6C- dérivées de tumeurs.

Analyse des Cellules Suppresseurs Dérivées de Myéloïdes (MDSC) dans un modèle murin CT.26 d’oncologie colorectale

Les sous-ensembles MDSC peuvent influencer plusieurs réponses pro-tumorales, y compris la suppression de la fonction immunitaire, et constituent une cible attrayante pour l’immunothérapie. Il s’agit d’une population cellulaire hétérogène. Le phénotype peut être façonné par des signaux dans le microenvironnement tumoral. Les données ci-dessus montrent comment le panel MDSC peut être utilisé pour l’identification de base des sous-ensembles MDSC granulocytaires (G-) et monocytaires (M-) dans les tumeurs dérivées de CT.26. Les cellules myéloïdes CD11b+ ont été identifiées pour la première fois dans la porte CD45+ après l’exclusion des lymphocytes CD3+CD19+. G-MDSC et M-MDSC ont été différenciés en fonction de l’expression des récepteurs de surface Ly-6G et Ly-6C.

Analyse de cellules suppressives dérivées de myéloïdes (MDSC), de cellules tueuses naturelles (NK) et de sous-ensembles de cellules dendritiques (DC) dans un modèle murin de tumeur colorectale CT.26.

Le panel myéloïde élargi est une extension du panel MDSC de base pour permettre l’analyse des sous-ensembles NK et DC en plus des populations MDSC. Dans les données présentées, ces sous-ensembles ont été analysés dans des tumeurs dérivées de CT.26. Les MDSC monocytaires (M-) et granulocytaires (G-) expriment des niveaux élevés de protéines Ly-6C et Ly-6G respectivement (Bright) et co-expriment le marqueur CD11b. Les NK et les DC ont été analysés dans la porte d’exclusion du MDSC et différenciés en fonction des marqueurs pan-NK (CD49b et CD335) par rapport à l’expression de la protéine CD11c spécifique des DC. Les pics rouges et gris représentent respectivement les cellules colorées et non colorées par CD11b.

Analyse des cellules myéloïdes dans les tumeurs à l’aide du panel myéloïde complet de MI Bioresearch

Le panel myéloïde complet s’appuie sur le panel de cellules suppressives dérivées du myéloïde de base pour une analyse plus approfondie des populations de cellules myéloïdes. Il permet également d’analyser le récepteur inhibiteur immunitaire PD-L1 sur des sous-ensembles de cellules tumorales et immunitaires. Les données ci-dessus montrent comment le panel myéloïde complet peut être utilisé pour A) mesurer l’expression de PD-L1 sur les cellules tumorales et immunitaires (modèle de carcinome du sein 4T1), B) quantifier les sous-ensembles de macrophages et de cellules dendritiques (modèle de tumeur colorectale CT.26), et C) caractériser les sous-ensembles MDSC pour l’expression de CD115, qui est un récepteur qui s’est avéré directement corrélé à l’activité suppressive (modèle de tumeur colorectale CT.26). Ce panel peut également être utile dans l’analyse des populations de neutrophiles et de monocytes (non illustré). Les pics rouges et gris représentent les cellules colorées pour l’antigène cible et les cellules non colorées respectivement.

Analyse de macrophages associés à une tumeur activés classiquement (M1) et alternativement (M2) dans un modèle d’adénocarcinome colorectal CT.26

Les macrophages M1 et M2 sont les deux principaux groupes de macrophages qui résident dans le microenvironnement tumoral. Ils ont des fonctions opposées vis-à-vis de la progression du cancer et sont donc des cibles pour de nouvelles immunothérapies. L’étude ci-dessus démontre comment le panel de macrophages associés aux tumeurs M1 et M2 peut être utilisé pour profiler les ratios de ces deux groupes. À cette fin, des sous-ensembles de MDSC ont été exclus afin que les macrophages CD11b+/F480+ puissent être identifiés. Cette fraction a été analysée pour les macrophages M2 (CD206+) et les macrophages M1 (CD206-MHCII+).

MAINTENANT DISPONIBLE

Capacités de cytométrie en flux spectral

Améliorez la clarté des données, gagnez en flexibilité et générez des résultats percutants à partir de petits échantillons grâce à nos panels spectraux pré-validés et à notre expertise en cytométrie spectrale en flux.

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